Skip to content

Długoterminowe badanie replikacji wirusa zapalenia wątroby typu C w nie-A, nie-B zapaleniu wątroby ad 7

2 tygodnie ago

522 words

Z tego powodu, oprócz stosowania najbardziej rygorystycznych standardowych środków ostrożności, testowaliśmy również każdą próbkę z ujemną kontrolą surowicy podczas ekstrakcji RNA, odwrotnej transkrypcji i amplifikacji. Nasze dane pokazują również, że inną ważną kwestią w stosowaniu diagnostycznego PCR jest występowanie wyników fałszywie ujemnych z powodu heterogeniczności genetycznej wzorcowego kwasu nukleinowego. Pierwszy zestaw zagnieżdżonych starterów, które wykorzystaliśmy, pochodzący z regionu NS3 genomu HCV, był w stanie zidentyfikować sekwencje HCV tylko u dwóch z pięciu badanych pacjentów pomimo potwierdzenia – potwierdzenia zakażenia szympansami – że większość z nich była zakaźna. . To skłoniło nas do zaprojektowania nowego zestawu starterów z regionu NS4, który pozwolił na wykrywanie wiremii HCV u pięciu pacjentów, a także u czterech szympansów zaszczepionych homologicznymi szczepami HCV. Dane te pokazują, że istnieje genetyczna heterogenność wśród szczepów HCV w Stanach Zjednoczonych, tak jak w Japonii, 18 19 20 21 i wskazują na znaczenie projektowania odpowiednich primerów w najbardziej zachowanych regionach genomu HCV. Uważa się, że wykrycie HCV RNA w surowicy jest czułym i wiarygodnym wskaźnikiem infekcyjności. Nasze badanie pokazuje, że w początkowej fazie ostrej infekcji HCV RNA HCV jest obecne w surowicy na długo przed wykryciem innych markerów. Co do zasady, RNA HCV wykryto u naszych pacjentów jeden do dwóch tygodni po transfuzji, w najwcześniejszej próbce dostępnej do testowania. Średni okres pomiędzy ekspozycją na HCV a pojawieniem się RNA HCV był bardzo krótki u wszystkich badanych pacjentów i szympansów. W przeciwieństwie do tego obserwowaliśmy przedłużony okres (do 8 tygodni) pomiędzy wykryciem HCV RNA a wystąpieniem zapalenia wątroby i jeszcze dłuższym odstępem (do 12 tygodni) przed pierwszym pojawieniem się anty-HCV. W tym serologicznie cichym okresie HCV RNA jest jedynym markerem, który pozwala na rozpoznanie pierwotnej infekcji HCV i identyfikację potencjalnie zakaźnych pacjentów, których można by pominąć podczas konwencjonalnego testowania przeciwciał. Wczesna replikacja HCV, udokumentowana u wszystkich naszych pacjentów, jest zgodna ze wzorem obserwowanym u eksperymentalnie zainfekowanych szympansów. W poprzednim badaniu tego modelu zwierzęcego Shimizu i in. nie wykrył HCV RNA aż do trzech do czterech dni po inokulacji, co sugeruje, że wyniki PCR odzwierciedlają de novo wirusową replikację zamiast pasywnego transferu wirusa z inokulum.11
Nasze odkrycie, że pomiar HCV RNA w surowicy może dostarczyć ważnych informacji na temat wyniku choroby, ma duże znaczenie kliniczne. Zasadniczo zaobserwowaliśmy dwa wzorce. Wirusowe zapalenie wątroby typu C było przejściowe w ostrym, samoograniczającym się zapaleniu wątroby, ale utrzymywało się przez okres do 14 lat u pacjentów, u których ostre zapalenie wątroby przechodziło do postaci przewlekłej. Uzyskaliśmy podobne wyniki w eksperymentalnie zaszczepionych szympansach. Natomiast utrzymywanie się przeciwciała nie zawsze korelowało z utrzymywaniem się infekcji. U pacjenta, u którego rozwinęło się zapalenie wątroby, pomimo usunięcia HCV RNA z krwi, testy na anty-HCV utrzymywały się dodatnio przez dziewięć lat. W związku z tym RNA HCV jest jedynym dostępnym obecnie markerem, który może rozróżnić pozorne zakażenie HCV od czynnej infekcji
[przypisy: badania kliniczne w polsce, jak wygląda półpasiec zdjęcia, ciekawe choroby genetyczne ]